Колориметрический метод определения нитритов по Гриссу
В основе метода лежит получение в кислой среде красной окраски при обработке растворов, содержащих нитриты, смесью α-нафтиламина и сульфаниловой кислоты. Азотистая кислота превращает сульфаниловую кислоту в диазосоединевие, которое, взаимодействуя с α-нафтиламином, дает красную азо-краску. Нарастание окраски идет медленно, максимум ее наступает через несколько часов. Однако удовлетворительное окрашивание растворов, позволяющее проводить определение, достигается через 15 мин. Максимум спектра поглощения лежит при 520 нм.
Метод очень чувствителен. Наиболее удобны для определения количества 0,1—0,05 мг N-NO2 в1 л. При содержании 0,2 мг N — NO2 в 1 л быстро выпадает осадок. Анализу подвергают образцы почв с естественной влажностью (свежевзятые).
Ход анализа. Для извлечения нитритов применяют водную вытяжку при отношении почва : вода, равном 1 : 5, и 3-минутном взбалтывании. К 40 мл прозрачной бесцветной водной вытяжки, помещенной в мерную колбу емкостью 50 мл, прибавляют 8 мл нитритного реактива, объем в колбе доводят водой до 50 мл. Сейчас же начинает появляться красная окраска, она развивается постепенно. Через 15 мин. после добавления к вытяжке нитритного реактива (необходимо строго соблюдать этот промежуток времени) определяют оптическую плотность окрашенных растворов с помощью фотоколориметров, используя светофильтры с областью пропускания 520—550 нм. Содержание N-NO2 в испытуемых растворах вычисляют по калибровочной кривой образцовых растворов. Для построения ее в мерные колбы емкостью 50 мл помещают 3, 5, 10 мл рабочего образцового раствора, объем доводят водой до 40 мл, прибавляют по 8 мл нитритного реактива, перемешивают и доводят водой до 50 мл. Через 15 мин. измеряют оптическую плотность растворов.
При использовании для просмотра растворов визуального колориметра испытуемые и образцовые растворы готовят одновременно и сравнивают спустя 15 мин. после прибавления нитритного реактива.
Реактивы. 1. Нитритный реактив. Готовят смешиванием равных объемов раствора сульфаниловой кислоты и α-нафтиламина. Реактив неустойчив, поэтому его готовят непосредственно перед употреблением.
Раствор сульфаниловой кислоты. Навеску 0,5 г х. ч. сульфаниловой кислоты растворяют в 100 мл уксусной кислоты (уд. вес. 1,04).
Раствор а-нафтиламина. Навеску 0,1 г α-нафтиламина кипятят в течение 5 мин. с 20 мл воды, процеживают через хорошо промытую хлопчатобумажную ткань в 180 мл уксусной кислоты (уд. вес 1,04). Нитритный реактив должен быть бесцветным. Если он имеет розовую окраску (от присутствия нитритов), раствор взбалтывают с цинковой пылью и отфильтровывают.
2. Образцовый раствор нитрита. Растворяют в воде 0,2463 г х. ч. сухого NaNO2, раствор переносят в мерную колбу и объем доводят водой до 1 л. Получают запасный образцовый раствор, в 1 мл которого содержится 0,05 мг N. Из него готовят рабочий образцовый раствор. Берут 10 мл запасного раствора и разводят его в 100 раз водой. Получают раствор, содержащий 0,5 мг N в 1 л. Раствор хранят в холодильнике.
Продажный реактив NaNO2 не всегда бывает достаточно чист для приготовления образцовых растворов. Для получения чистого препарата 0,1099 г х. ч. AgNO2 растворяют в 100—150 мл воды; к раствору прибавляют хлористый натр до прекращения выпадения осадка AgCl; смесь в мерной колбе доводят водой до 200 мл, сильно встряхивают и оставляют в темноте, пока не осядет осадок. Прозрачный раствор сливают, 1 мл его содержит 0,05 мг N (запасный образцовый раствор). Для получения рабочего образцового раствора 10 мл запасного раствора разводят в 100 раз водой; получают раствор, содержащий 0,5 мг N в 1 л. Чистое азотистокислое серебро приготовляют прибавлением к 16 частям концентрированного горячего раствора азотнокислого серебра 10 частей концентрированного горячего раствора азотистокислого калия. Осадок AgNO2 отделяют от маточного раствора отсасыванием на воронке Бюхнера. Азотистокислое серебро снова растворяют в возможно меньшем объеме горячей воды, раствору дают охладиться и кристаллический осадок отделяют на воронке Бюхнера (стараясь как можно больше отжать раствора); осадок высушивают на водяной бане и хранят в плотно закрытой склянке а темноте.
